ISO/TS 11059:2009
(Main)Milk and milk products — Method for the enumeration of Pseudomonas spp.
Milk and milk products — Method for the enumeration of Pseudomonas spp.
ISO/TS 11059|IDF/RM 225:2009 describes a method for the enumeration of Pseudomonas spp. in milk and milk products. The method allows the isolation of all pigmented and non-pigmented psychrophilic Pseudomonas spp. ISO/TS 11059|IDF/RM 225:2009 is also applicable to dairy samples.
Lait et produits laitiers — Méthode de dénombrement des Pseudomonas spp.
L'ISO/TS 11059|FIL/MR 225:2009 décrit une méthode de dénombrement des Pseudomonas spp. dans le lait et les produits laitiers. Cette méthode permet d'isoler tous les Pseudomonas spp. psychrophiles pigmentés et non pigmentés. L'ISO/TS 11059|FIL/MR 225:2009 s'applique également à des échantillons d'environnement du secteur laitier.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 11059
IDF/RM
First edition
2009-08-01
Milk and milk products — Method for the
enumeration of Pseudomonas spp.
Lait et produits laitiers — Méthode de dénombrement des
Pseudomonas spp.
Reference numbers
IDF/RM 225:2009(E)
©
ISO and IDF 2009
IDF/RM 225:2009(E)
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and IDF national committees. In the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the ISO Central Secretariat at the
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Published in Switzerland
ii © ISO and IDF 2009 – All rights reserved
IDF/RM 225:2009(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has
been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
technical committee may decide to publish other types of document:
— an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical experts in
an ISO working group and is accepted for publication if it is approved by more than 50 % of the members
of the parent committee casting a vote;
— an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a technical
committee and is accepted for publication if it is approved by 2/3 of the members of the committee casting
a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for a
further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or ISO/TS is
confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be transformed into an
International Standard or be withdrawn.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO/TS 11059⎪IDF/RM 225 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee
SC 5, Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF). It is being published jointly by ISO
and IDF.
IDF/RM 225:2009(E)
Foreword
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit organization representing the dairy sector worldwide.
IDF membership comprises National Committees in every member country as well as regional dairy
associations having signed a formal agreement on cooperation with IDF. All members of IDF have the right to
be represented on the IDF Standing Committees carrying out the technical work. IDF collaborates with ISO in
the development of standard methods of analysis and sampling for milk and milk products.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the Action Teams and Standing Committees are circulated to the National Committees for voting.
Publication as an International Standard requires approval by at least 50 % of the IDF National Committees
casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a
Standing Committee may decide to publish an other type of normative document which is called by IDF:
Reviewed method. Such a method represents an agreement between the members of a Standing Committee
and is accepted for publication if it is approved by at least 50 % of the committee members casting a vote.
A Reviewed method is equal to an ISO/PAS or ISO/TS and will, therefore, also be published jointly under ISO
conditions.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO/TS 11059⎪IDF/RM 225 was prepared by the International Dairy Federation (IDF) and Technical
Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk products. It is being published
jointly by IDF and ISO.
All work was carried out by the Joint ISO-IDF Action Team on Microbiological harmonization of the Standing
Committee on Microbiological methods of analysis under the aegis of its project leader, Mrs P. Rollier (FR).
iv © ISO and IDF 2009 – All rights reserved
TECHNICAL SPECIFICATION
IDF/RM 225:2009(E)
Milk and milk products — Method for the enumeration of
Pseudomonas spp.
1 Scope
This Technical Specification describes a method for the enumeration of Pseudomonas spp. in milk and milk
products. The method allows the isolation of all pigmented and non-pigmented psychrophilic Pseudomonas
spp.
This Technical Specification is also applicable to dairy environmental samples.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 6887-5, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination — Part 5: Specific rules for the preparation of milk and
milk products
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for
microbiological examinations
ISO/TS 11133-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and production
of culture media — Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of culture media in the
laboratory
ISO/TS 11133-2, Microbiology of food and animal feeding stuffs — Guidelines on preparation and production
of culture media — Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
Pseudomonas spp.
species of bacteria of the genus Pseudomonas which form colonies in penicillin and pimaricin agar (PPA) at
25 °C displaying the biochemical characteristics described, when tested as described in this Technical
Specification
4 Principle
The surface of a solid selective culture medium is inoculated with a specified quantity of the test sample if the
product is liquid, or with a specified quantity of the initial suspension in the case of other products. The
inoculation is done, under the same conditions, using decimal dilutions of the test sample or of the initial
suspension.
IDF/RM 225:2009(E)
The plates are incubated aerobically at 25 °C for 48 h.
The number of Pseudomonas is calculated per millilitre, or per gram, of sample from the number of colonies
obtained on plates at dilution levels chosen so as to give a significant result, and after confirmation of the
selected colonies by the oxidase test and glucose fermentation test.
5 Diluent, culture media and reagent
5.1 General
For current laboratory practice, see ISO/TS 11133-1 and ISO/TS 11133-2.
5.2 Diluent
See ISO 6887-5.
5.3 Penicillin and pimaricin agar (PPA)
5.3.1 Basic medium
5.3.1.1 Composition
Component Amount
Enzymatic digest of gelatine 16,0 g
Enzymatic digest of casein 10,0 g
Potassium sulfate (K SO ) 10,0 g
2 4
Magnesium chloride (MgCl ) 1,4 g
a
Agar
12,0 g to 18,0 g
Water 1 000 ml
a
Depending on the gel strength of the agar.
5.3.1.2 Preparation
Dissolve the components or the dehydrated complete medium in the water by boiling. Adjust the pH, if
necessary, so that after sterilization it is 7,2 ± 0,2 at 25 °C. Dispense the basic medium into flasks or bottles of
appropriate capacity. Sterilize the medium in the autoclave (6.1) at 121 °C for 15 min.
5.3.2 Inhibitor solutions
5.3.2.1 Penicillin solution
5.3.2.1.1 Composition
Component Amount
Pen
...
SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 11059
FIL/MR
Première édition
2009-08-01
Lait et produits laitiers — Méthode de
dénombrement des Pseudomonas spp.
Milk and milk products — Method for the enumeration of Pseudomonas
spp.
Numéros de référence
FIL/MR 225:2009(F)
©
ISO et FIL 2009
FIL/MR 225:2009(F)
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surviendrait un problème d'utilisation, veuillez en informer le Secrétariat central de l'ISO à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
soit de l'ISO soit de la FIL, à l'une ou l'autre des adresses ci-après.
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Fax + 41 22 749 09 47 Fax + 32 2 733 04 13
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Publié en Suisse
ii © ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés
FIL/MR 225:2009(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
Dans d'autres circonstances, en particulier lorsqu'il existe une demande urgente du marché, un comité
technique peut décider de publier d'autres types de documents:
— une Spécification publiquement disponible ISO (ISO/PAS) représente un accord entre les experts dans
un groupe de travail ISO et est acceptée pour publication si elle est approuvée par plus de 50 % des
membres votants du comité dont relève le groupe de travail;
— une Spécification technique ISO (ISO/TS) représente un accord entre les membres d'un comité technique
et est acceptée pour publication si elle est approuvée par 2/3 des membres votants du comité.
Une ISO/PAS ou ISO/TS fait l'objet d'un examen après trois ans afin de décider si elle est confirmée pour trois
nouvelles années, révisée pour devenir une Norme internationale, ou annulée. Lorsqu'une ISO/PAS ou
ISO/TS a été confirmée, elle fait l'objet d'un nouvel examen après trois ans qui décidera soit de sa
transformation en Norme internationale soit de son annulation.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO/TS 11059⎪FIL/MR 225 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération Internationale de laiterie (FIL). Elle est publiée
conjointement par l'ISO et la FIL.
© ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés iii
FIL/MR 225:2009(F)
Avant-propos
La FIL (Fédération Internationale de Laiterie) est une organisation sans but lucratif représentant le secteur
laitier mondial. Les membres de la FIL se composent des Comités Nationaux dans chaque pays membre et
des associations laitières régionales avec lesquelles la FIL a signé des accords de coopération. Tout membre
de la FIL a le droit de faire partie des Comités permanents de la FIL auxquels sont confiés les travaux
techniques. La FIL collabore avec l'ISO pour l'élaboration de méthodes normalisées d'analyse et
d'échantillonnage pour le lait et les produits laitiers.
La tâche principale des comités techniques est de préparer les Normes internationales. Les Normes
internationales provisoires adoptées par les groupes de travail et le Comités Permanents sont circulés aux
Comités nationaux pour approbation. La publication en tant que Norme internationale requiert l'approbation
d'au moins 50 % des Comité Nationaux de la FIL participant au vote.
Dans d'autres circonstances, particulièrement quand une demande urgente du marché survient pour de tels
documents, un Comité permanent peut décider de publier un autre type de document à valeur de norme que
la FIL appelle Méthode révisée. Une telle méthode illustre un consensus entre les membres d'un Comité
permanent et est acceptée pour publication si elle est approuvée par au moins 50 % des Comités Nationaux
émettant un vote. Une Méthode révisée est équivalente à une ISO/PAS ou à une ISO/TS et sera donc aussi
publiée conjointement selon les conditions ISO.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO/TS 11059⎪FIL/MR 225 été élaborée par la Fédération internationale de laiterie (FIL) et le comité
technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Elle est publiée
conjointement par l'ISO et la FIL.
L'ensemble des travaux a été confié à l'Équipe d'Action mixte ISO/FIL, Harmonisation microbiologique, du
Comité permanent, Méthodes microbiologiques d'analyse, sous la conduite de son chef de projet,
Mme P. Rollier (FR).
iv © ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés
SPÉCIFICATION TECHNIQUE
FIL/MR 225:2009(F)
Lait et produits laitiers — Méthode de dénombrement des
Pseudomonas spp.
1 Domaine d'application
La présente Spécification technique décrit une méthode de dénombrement des Pseudomonas spp. dans le
lait et les produits laitiers. Cette méthode permet d'isoler tous les Pseudomonas spp. psychrophiles pigmentés
et non pigmentés.
La présente Spécification technique s'applique également à des échantillons d'environnement du secteur
laitier.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition de la
publication à laquelle il est fait référence (y compris tous les amendements) s'applique.
ISO 6887-5, Microbiologie des aliments — Préparation des échantillons, de la suspension mère et des
dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique — Partie 5: Règles spécifiques pour la préparation de
produits laitiers
ISO 7218, Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommendations
ISO/TS 11133-1, Microbiologie des aliments — Lignes directrices pour la préparation et la production des
milieux de culture — Partie 1: Lignes directrices générales d'assurance qualité pour la préparation des milieux
de culture en laboratoire
ISO/TS 11133-2, Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la production des milieux de
culture — Partie 2: Guide général pour les essais de performance des milieux de culture
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s'appliquent.
3.1
Pseudomonas spp.
bactérie du genre Pseudomonas qui forme des colonies sur gélose à la pénicilline et à la pimaricine (PPA) à
25 °C en présentant les caractéristiques biochimiques décrites, lorsqu'elle est soumise à essai comme décrit
dans la présente Spécification technique
© ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés 1
FIL/MR 225:2009(F)
4 Principe
La surface d'un milieu de culture sélectif solide est inoculé avec une quantité spécifiée de l'échantillon pour
essai si le produit est liquide, ou avec une quantité spécifiée de la suspension mère dans le cas des autres
produits. L'inoculation est effectuée dans les mêmes conditions, en utilisant des dilutions décimales de
l'échantillon pour essai ou de la suspension mère.
Les boîtes sont incubées en aérobiose à 25 °C pendant 48 h.
Le nombre de Pseudomonas est calculé par millilitre ou par gramme d'échantillon, à partir du nombre de
colonies obtenu sur les boîtes à des niveaux de dilution choisis permettant d'obtenir un résultat significatif, et
après confirmation des colonies sélectionnées par le test oxydase et le test de fermentation du glucose.
5 Diluant, milieux de culture et réactif
5.1 Généralités
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir l'ISO/TS 11133-1 et l'ISO/TS 11133-2.
5.2 Diluant
Voir l'ISO 6887-5.
5.3 Gélose à la pénicilline et à la pimaricine (PPA)
5.3.1 Milieu de base
5.3.1.1 Composition
Composant Quantité
Digestat enzymatique de gélatine 16,0 g
Digestat enzymatique de caséine 10,0 g
Sulfate de potassium (K SO ) 10,0 g
2 4
Chlorure de magnésium (MgCl ) 1,4 g
a
Agar-agar
12,0 g à 18,0 g
Eau 1 000 ml
a
En fonction du pouvoir gélifiant de l'agar-agar.
5.3.1.2 Préparation
Dissoudre les composants ou le milieu complet déshydraté dans l'eau en portant à ébullition. Si nécessaire,
ajuster le pH de manière qu'il soit de 7,2 ± 0,2 à 25 °C après stérilisation. Répartir le milieu de base dans des
fioles ou des flacons de capacité appropriée. Stériliser le milieu à l'autoclave (6.1) à 121 °C pendant 15 min.
2 © ISO et FIL 2009 – Tous droits réservés
FIL/MR 225
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.