ISO 13646:2025
(Main)Water quality — Determination of selected estrogens in whole water samples — Method using solid phase extraction (SPE) followed by liquid chromatography (LC) or gas chromatography (GC) coupled to mass spectrometry (MS) detection
Water quality — Determination of selected estrogens in whole water samples — Method using solid phase extraction (SPE) followed by liquid chromatography (LC) or gas chromatography (GC) coupled to mass spectrometry (MS) detection
This document specifies methods for the determination of five selected estrogens in whole water samples listed in Table 1 (see REF Section_sec_4 \r \h Clause 4 08D0C9EA79F9BACE118C8200AA004BA90B02000000080000000E000000530065006300740069006F006E005F007300650063005F0034000000 ). The methods are based on solid-phase extraction (SPE; disk or cartridge) followed by liquid or gas chromatography-mass spectrometry detection (tandem mass spectrometry or high resolution mass spectrometry). Depending on the sample preparation chosen, the sample preparation can be applicable to the analysis of selected estrogens in drinking water, groundwater and surface water containing suspended particulate matter (SPM) up to 500 mg/l, dissolved organic carbon (DOC) content up to 14 mg/l (whole water samples). The lower application range defined as verified limit of quantification can vary depending on the methods, the sensitivity of the equipment used and the matrix of the sample. The range is 0,006 ng/l to 1 ng/l for 17alpha-ethinylestradiol (EE2) and 0,038 ng/l to 1 ng/l for the other estrogens in drinking water, ground water and surface water. The upper limit of the working range is approximately tens of nanograms per litre. For application that targets the measurements of very low level concentrations (between the lowest LOQ and 0,1 ng/l), every single step of the procedure becomes critical. The methods can be used to determine further estrogens or hormones in other types of water, for example treated wastewater, if accuracy has been tested and verified for each case as well as storage conditions of both samples and reference solutions have been validated.
Qualité de l’eau — Dosage d’œstrogènes sélectionnés dans des échantillons d’eau totale — Méthode par extraction en phase solide (SPE) suivie d’une détection par chromatographie en phase liquide (CL) ou en phase gazeuse (CG) couplée à la spectrométrie de masse (SM)
Le présent document spécifie des méthodes pour le dosage de cinq œstrogènes sélectionnés dans les échantillons d’eau totale, qui sont répertoriés dans le Tableau 1 (voir REF Section_sec_4 \r \h l’Article 4 08D0C9EA79F9BACE118C8200AA004BA90B02000000080000000E000000530065006300740069006F006E005F007300650063005F0034000000 ). Les méthodes reposent sur une extraction en phase solide (SPE sur disque et/ou cartouche) suivie d’une détection par chromatographie en phase liquide ou gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (spectrométrie de masse en tandem et/ou spectrométrie de masse haute résolution). Selon la préparation des échantillons choisie, la préparation de l’échantillon peut être appliquée à l’analyse des œstrogènes sélectionnés dans l’eau potable, les eaux souterraines et les eaux de surface contenant une teneur en matières en suspension (MES) jusqu’à 500 mg/l et une teneur en carbone organique dissous (COD) jusqu’à 14 mg/l (échantillons d’eau totale). La gamme d’application basse définie en tant que limite de quantification vérifiée peut varier selon les méthodes, la sensibilité de l’équipement utilisé et la matrice de l’échantillon. La gamme s’étend de 0,006 ng/l à 1 ng/l pour le 17alpha-éthinylestradiol (EE2) et de 0,038 ng/l à 1 ng/l pour les autres œstrogènes dans l’eau potable, les eaux souterraines et les eaux de surface. La limite supérieure du domaine d’application est de l’ordre de la dizaine de nanogrammes par litre. Pour une application qui vise à mesurer de très faibles niveaux de concentration (entre la plus faible LQ et 0,1 ng/l), chaque étape individuelle des modes opératoires revêt une importance critique. Les méthodes peuvent être utilisées pour doser d’autres œstrogènes ou hormones dans d’autres types d’eau, par exemple les eaux usées traitées, sous réserve que l’exactitude ait été soumise à essai et démontrée pour chaque cas et que les conditions de conservation des échantillons et des solutions de référence aient été validées.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
International
Standard
ISO 13646
First edition
Water quality — Determination of
2025-10
selected estrogens in whole water
samples — Method using solid
phase extraction (SPE) followed by
liquid chromatography (LC) or gas
chromatography (GC) coupled to
mass spectrometry (MS) detection
Qualité de l’eau — Dosage d’œstrogènes sélectionnés dans des
échantillons d’eau totale — Méthode par extraction en phase
solide (SPE) suivie d’une détection par chromatographie en phase
liquide (CL) ou en phase gazeuse (CG) couplée à la spectrométrie
de masse (SM)
Reference number
© ISO 2025
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Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms, definitions and subscripts . 2
3.1 Terms and definitions .2
3.2 Subscripts . .4
4 Principle . 4
5 Interferences . 5
5.1 General .5
5.2 Interferences with sampling, extraction and concentration . .5
5.3 Interferences during high performance liquid chromatography and mass spectrometry .6
5.4 Interferences during gas phase chromatography and mass spectrometry .7
5.5 Interferences from internal standards .8
6 Reagents . 8
7 Apparatus . 14
8 Sampling . 16
9 Procedure . 17
9.1 General .17
9.2 Sample preparation and extraction .18
9.2.1 General .18
9.2.2 Sample preparation .18
9.2.3 SPE cartridge extraction .19
9.2.4 SPE disk Extraction . 20
9.3 Sample clean-up (purification) . 20
9.3.1 General . 20
9.3.2 Principle .21
9.3.3 Procedure .21
9.4 Reconcentration .21
9.5 Liquid chromatography coupled to mass spectrometry . 22
9.5.1 High performance liquid chromatography (LC) . 22
9.5.2 Detection . 22
9.5.3 Derivatization . 23
9.6 Gas chromatography coupled to mass spectrometry .24
9.6.1 Derivatization .24
9.6.2 Gas chromatography (GC) . 25
9.6.3 Detection . 25
10 Calibration .26
10.1 General . 26
10.2 Calibration by isotope dilution . 26
10.3 Calibration check .27
11 Quality assurance and quality control (QA/QC) .27
11.1 Identification of the substances .27
11.2 Blanks .27
12 Limit of quantification (LOQ) .28
13 Calculation of recovery .28
13.1 General . 28
13.2 Calculation of analyte recovery using samples . 28
13.3 Recovery rates from internal standards . 29
iii
14 Calculation of the concentration in the sample .29
15 Expression of results .30
16 Test report .30
17 Performance data .31
Annex A (informative) Performance data .32
Annex B (informative) Examples of SPE cartridge extraction protocols .35
Annex C (informative) Examples of SPE disk extraction protocols .37
Annex D (informative) Examples of SPE clean-up protocols .39
Annex E (informative) Examples of LC-MS/MS protocols . 41
Annex F (informative) Example of LC-HRMS protocol .52
Annex G (informative) Examples of GC-MS/MS protocols .56
Annex H (informative) Example of GC-HRMS protocol . 61
Bibliography .62
iv
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval cr
...
Norme
internationale
ISO 13646
Première édition
Qualité de l’eau — Dosage
2025-10
d’œstrogènes sélectionnés dans
des échantillons d’eau totale —
Méthode par extraction en phase
solide (SPE) suivie d’une détection
par chromatographie en phase
liquide (CL) ou en phase gazeuse
(CG) couplée à la spectrométrie de
masse (SM)
Water quality — Determination of selected estrogens in whole
water samples — Method using solid phase extraction (SPE)
followed by liquid chromatography (LC) or gas chromatography
(GC) coupled to mass spectrometry (MS) detection
Numéro de référence
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CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes, définitions et indices . 2
3.1 Termes et définitions .2
3.2 Indices .4
4 Principe. 4
5 Interférences . 5
5.1 Généralités .5
5.2 Interférences liées à l’échantillonnage, l’extraction et la concentration .6
5.3 Interférences lors de l’analyse par chromatographie en phase liquide haute
performance et spectrométrie de masse .6
5.4 Interférences lors de l’analyse par chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie
de masse .7
5.5 Interférences des étalons internes .8
6 Réactifs . 8
7 Appareillage . 14
8 Échantillonnage .16
9 Mode opératoire . 17
9.1 Généralités .17
9.2 Préparation de l’échantillon et extraction .18
9.2.1 Généralités .18
9.2.2 Préparation de l’échantillon .18
9.2.3 Extraction SPE sur cartouche .19
9.2.4 Extraction SPE sur disque . 20
9.3 Purification de l’échantillon . .21
9.3.1 Généralités .21
9.3.2 Principe.21
9.3.3 Mode opératoire . .21
9.4 Reconcentration . 22
9.5 Chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse . 22
9.5.1 Chromatographie en phase liquide haute performance (CL) . 22
9.5.2 Détection . 22
9.5.3 Dérivation . 23
9.6 Chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse . 25
9.6.1 Dérivation . 25
9.6.2 Chromatographie en phase gazeuse (CG) . 25
9.6.3 Détection . 25
10 Étalonnage .26
10.1 Généralités . 26
10.2 Étalonnage par dilution isotopique .27
10.3 Contrôle de l’étalonnage .27
11 Programme d’assurance qualité et de contrôle qualité (AQ/CQ) .28
11.1 Identification des composés . 28
11.2 Blancs . 28
12 Limite de quantification (LQ) .28
13 Calcul du taux de récupération .29
13.1 Généralités . 29
iii
13.2 Calcul du taux de récupération des analytes à l’aide d’échantillons . 29
13.3 Taux de récupération des étalons internes . 30
14 Calcul de la concentration dans l’échantillon .30
15 Expression des résultats .31
16 Rapport d’essai .31
17 Données de performance .31
Annexe A (informative) Données de performance .32
Annexe B (informative) Exemples de protocoles d’extraction SPE sur cartouche .36
Annexe C (informative) Exemples de protocoles d’extraction SPE sur disque .38
Annexe D (informative) Exemples de protocoles de purification par SPE .40
Annexe E (informative) Exemples de protocoles de CL-SM/SM .42
Annexe F (informative) Exemples de protocoles de CL-SMHR .53
Annexe G (informative) Exemples de protocoles de CG-SM/SM .57
Annexe H (informative) Exemple de protocoles de CG-SMHR .62
Bibliographie .63
iv
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.