ISO 11268-1:2012

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11268-1
Second edition
2012-11-01
Soil quality — Effects of pollutants on
earthworms —
Part 1:
Determination of acute toxicity to Eisenia
fetida/Eisenia andrei
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre —
Partie 1: Détermination de la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/
Eisenia andrei
Reference number
©
ISO 2012
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member body in the country of the requester.
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Published in Switzerland
ii © ISO 2012 – All rights reserved

Contents Page
Foreword .iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Principle . 3
5 Reagents and material . 3
6 Apparatus . 5
7 Procedure . 5
7.1 Experimental design . 5
7.2 Preparation of test mixture . 6
7.3 Addition of the earthworms . 8
7.4 Test conditions and measurements . 8
7.5 Reference substance . 8
8 Calculation and expression of results . 8
8.1 Calculation . 8
8.2 Expression of results . 8
9 Validity of the test . 9
10 Statistical analysis . 9
10.1 General . 9
10.2 Single-concentration tests . 9
10.3 Multi-concentration tests .10
11 Test report . 11
Annex A (informative) Determination of the acute toxicity of chemicals (in particular pesticides) on
earthworms under tropical test conditions .12
Annex B (informative) Culturing of Eisenia fetida and Eisenia andrei .14
Annex C (informative) Determination of water holding capacity of artificial soil .15
Annex D (informative) Background information on the acute effect of boric acid on earthworms .16
Bibliography .17
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International
Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11268-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4,
Biological methods.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 11268-1:1993), which has been technically revised.
ISO 11268 consists of the following parts, under the general title Soil quality — Effects of pollutants on earthworms:
— Part 1: Determination of acute toxicity to Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Part 2: Determination of effects on reproduction of Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Part 3: Guidance on the determination of effects in field situations
iv © ISO 2012 – All rights reserved

Introduction
Ecotoxicological test systems are applied to obtain information about the effects of contaminants in soil and are
[33] [34]
proposed to complement conventional chemical analysis (see ISO 15799 and ISO 17616 ). ISO 15799
includes a list and short characterization of recommended and standardized test systems, and ISO 17616 gives
guidance on the choice and evaluation of the bioassays. Aquatic test systems with soil eluate are applied to
obtain information about the fraction of contaminants potentially reaching the groundwater by the water path
(retention function of soils), whereas terrestrial test systems are used to assess the habitat function of soils. As
standardized test systems using earthworms as indicator organisms for the habitat function of soil, an acute
test for survival and a chronic test for reproduction are available.
This part of ISO 11268 describes a method that is based on the determination of the acute toxicity of
contaminated soils to adult earthworms of the species Eisenia fetida (Savigny 1826) and Eisenia andrei (André
1963). Optionally, the method can be used for testing chemicals added to a standard soil (e.g. artificial soil) for
their acute toxic potential to earthworms. Finally, information is provided on how to use this method for testing
chemicals under tropical conditions (see Annex A).
Eisenia fetida and Eisenia andrei are considered to be representatives of soil fauna and earthworms in
particular. Background information on the ecology of earthworms and their use in ecotoxicological testing is
available. Other species, e.g. Aporrectodea caliginosa, Lumbricus rubellus and Lumbricus terrestris, have also
been used as test organisms. These or other species have not been proven to be more sensitive in general,
[15][16][23]
and the database and experience in testing soils is small .
This part of ISO 11268 has been drawn up taking into consideration test procedures adopted by the Organization
[26][27] [9]
for Economic Cooperation and Development and by the European Union .
INTERNATIONAL STANDARD ISO 11268-1:2012(E)
Soil quality — Effects of pollutants on earthworms —
Part 1:
Determination of acute toxicity to Eisenia fetida/Eisenia andrei
WARNING — Contaminated soils may contain unknown mixtures of toxic, mutagenic, or otherwise harmful
chemicals or infectious microorganisms. Occupational health risks may arise from dust or evaporated
chemicals during handling and incubation. Precautions should be taken to avoid skin contact.
1 Scope
This part of ISO 11268 specifies one of the methods for evaluating the habitat function of soils and determining
the acute toxicity of soil contaminants and chemicals to Eisenia fetida/Eisenia andrei by dermal and alimentary
uptake. It is applicable to soils and soil materials of unknown quality, e.g. from contaminated sites, amended
soils, soils after remediation, agricultural or other sites concerned, and waste materials.
Effects of substances are assessed using a standard soil, preferably a defined artificial soil substrate. For
contaminated soils, the effects on survival are determined in the test soil and in a control soil. According to
the objective of the study, the control and dilution substrate (dilution series of contaminated soil) should be
either an uncontaminated soil comparable to the soil sample to be tested (reference soil) or a standard soil
(e.g. artificial soil).
Information is provided on how to use this method for testing chemicals under temperate as well as under
tropical conditions.
The method is not applicable to volatile substances, i.e. substances for which H (Henry’s constant) or the
air/water partition coefficient is greater than 1, or for which the vapour pressure exceeds 0,013 3 Pa at 25 °C.
This method does not take into account the possible degradation of the substances or contaminants during the test.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document
(including any amendments) applies.
ISO 10381-6, Soil quality — Sampling — Part 6: Guidance on the collection, handling and storage of soil under
aerobic conditions for the assessment of microbiological processes, biomass and diversity in the laboratory
ISO 10390, Soil quality — Determination of pH
ISO 10694, Soil quality — Determination of organic and total carbon after dry combustion (elementary analysis)
ISO 11260, Soil quality — Determination of effective cation exchange capacity and base saturation level using
barium chloride solution
ISO 11277, Soil quality — Determination of particle size distribution in mineral soil material — Method by
sieving and sedimentation
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric method
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
contaminant
substance or agent present in the soil as a result of human activity
[ISO 15176:2002]
3.2
survival
percentage of living worms at the end of the test period
3.3
mortality
percentage of dead or missing worms at the end of the test period
3.4
LC
lethal concentration
median lethal percentage of a test sample in a reference or a standard control soil, or concentration of a
substance in the test sample, which kills 50 % of the test animals within the test period
NOTE The LC is expressed as a percentage of test-soil dry mass per test-mixture dry mass.
3.5
limit test
single concentration test consisting of at least four replicates each, the test sample without any dilution or the
highest concentration of test substance mixed into the control soil and the control
3.6
lowest observed effect rate (LOER) or effect concentration (LOEC)
lowest tested percentage of a test sample in a control soil or concentration of a substance at which a statistically
significant effect is observed
NOTE The LOEC is expressed as a percentage of test-soil dry mass per test-mixture dry mass. All test mixtures
above the LOEC have a harmful effect equal to or greater than that observed at the LOEC. If this condition cannot be
satisfied, an explanation should be given for how the LOEC and NOEC (3.7) have been selected.
3.7
NOEC
no observed effect concentration
test soil percentage immediately below the LOEC or, highest tested concentration of a test substance which,
when compared to the control, has no statistically significant lethal or other effect such as mass alteration (error
probability: p < 0,05)
NOTE The NOEC is expressed as a percentage of test-soil dry mass per test-mixture dry mass.
3.8
reference soil
uncontaminated site-specific soil (e.g. collected in the vicinity of a contaminated site) with similar properties
(nutrient concentrations, pH, organic carbon c
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11268-1
Deuxième édition
2012-11-01
Qualité du sol — Effets des polluants vis-
à-vis des vers de terre —
Partie 1:
Détermination de la toxicité aiguë vis-à-
vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei
Soil quality — Effects of pollutants on earthworms —
Part 1: Determination of acute toxicity to Eisenia fetida/Eisenia andrei
Numéro de référence
©
ISO 2012
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Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit
de l’ISO à l’adresse ci-après ou du comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
ii © ISO 2012 – Tous droits réservés

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction . v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Réactifs et matériaux . 4
6 Appareillage . 5
7 Mode opératoire . 6
7.1 Plan d’expérimentation . 6
7.2 Préparation des mélanges d’essai . 7
7.3 Introduction des vers de terre . 8
7.4 Conditions d’essai et mesurages . 8
7.5 Substance de référence . 9
8 Calcul et expression des résultats . 9
8.1 Calcul . 9
8.2 Expression des résultats . 9
9 Validité de l’essai . 9
10 Analyse statistique .10
10.1 Généralités .10
10.2 Essais à une seule concentration .10
10.3 Essais à plusieurs concentrations . 11
11 Rapport d’essai .12
Annexe A (informative) Détermination de la toxicité aiguë des substances chimiques (en particulier les
pesticides) sur les vers de terre dans des conditions d’essai tropicales .13
Annexe B (informative) Élevage d’Eisenia fetida et d’Eisenia andrei .15
Annexe C (informative) Détermination de la capacité de rétention d’eau .16
Annexe D (informative) Informations de base sur l’effet aigu de l’acide borique sur les vers de terre .17
Bibliographie .18
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 11268-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 11268-1:1993), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
L’ISO 11268 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité du sol — Effets des
polluants vis-à-vis des vers de terre:
— Partie 1: Détermination de la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Partie 2: Détermination des effets sur la reproduction de Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Partie 3: Lignes directrices relatives à la détermination des effets sur site
iv © ISO 2012 – Tous droits réservés

Introduction
Des systèmes d’essais écotoxicologiques sont mis en œuvre pour obtenir des informations sur les effets des
contaminants présents dans le sol et sont proposés en complément d’une analyse chimique conventionnelle
[33] [34]
(voir l’ISO 15799 et l’ISO 17616 ). L’ISO 15799 comprend une liste et une brève caractérisation des
systèmes d’essais recommandés et normalisés et l’ISO 17616 donne des lignes directrices pour le choix et
l’évaluation des essais biologiques. Les systèmes d’essais aquatiques sur éluat de sol sont mis en œuvre pour
obtenir des informations sur la fraction des contaminants susceptibles d’atteindre les eaux souterraines par le
mouvement de l’eau (fonction de rétention des sols), alors que les systèmes d’essais terrestres sont utilisés
pour évaluer la fonction d’habitat des sols. En tant que systèmes d’essais normalisés utilisant des vers de terre
comme organismes indicateurs pour la fonction d’habitat du sol, un essai de toxicité aiguë pour la survie et un
essai de toxicité chronique pour la reproduction sont disponibles.
La présente partie de l’ISO 11268 décrit une méthode basée sur la détermination de la toxicité aiguë des sols
contaminés pour des vers de terre adultes des espèces Eisenia fetida (Savigny 1826) et Eisenia andrei (André
1963). La méthode peut éventuellement être utilisée pour évaluer le potentiel toxique aigu pour les vers de terre
de produits chimiques ajoutés à un sol standard (par exemple un sol artificiel). En dernier lieu, des informations
sont fournies sur la manière d’utiliser cette méthode pour évaluer des produits chimiques dans des conditions
tropicales (voir l’Annexe A).
Eisenia fetida et Eisenia andrei sont considérés comme étant représentatifs de la faune du sol et des vers de
terre en particulier. Des informations de base sur l’écologie des vers de terre et leur utilisation en écotoxicologie
sont disponibles. D’autres espèces, par exemple Aporrectodea caliginosa, Lumbricus rubellus et Lumbricus
terrestris, ont également été utilisées comme organismes d’essai. En général, ces espèces ou d’autres ne
se sont pas avérées plus sensibles, et les bases de données et l’expérience dans l’évaluation des sols sont
[15][16][23]
réduites .
La présente partie de l’ISO 11268 a été élaborée en tenant compte des modes opératoires d’essai adoptés par
[26][27] [9]
l’Organisation de coopération et de développement économiques et par l’Union européenne .
NORME INTERNATIONALE ISO 11268-1:2012(F)
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre —
Partie 1:
Détermination de la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/
Eisenia andrei
AVERTISSEMENT — Les sols contaminés peuvent contenir des mélanges inconnus de produits
chimiques toxiques, mutagènes ou nocifs d’une autre manière ou des micro-organismes infectieux.
Des risques pour la santé au travail peuvent survenir en raison de la poussière ou de l’évaporation de
produits chimiques pendant la manipulation et l’incubation. Il convient de prendre des mesures pour
éviter tout contact avec la peau.
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 11268 spécifie l’une des méthodes permettant d’évaluer la fonction d’habitat des sols
et de déterminer la toxicité aiguë de contaminants du sol et de produits chimiques pour Eisenia fetida/Eisenia
andrei par absorption cutanée et ingestion. Elle s’applique aux sols et aux matériaux de type sol de qualité
inconnue, provenant, par exemple, de sites contaminés, de sols amendés, de sols après remédiation, de sols
agricoles ou autres sites d’intérêt et de déchets.
Les effets des substances sont évalués à l’aide d’un sol standard, de préférence un substrat de sol artificiel
défini. Pour les sols contaminés, les effets sur la survie sont déterminés dans le sol soumis à essai et dans un
sol témoin. Selon l’objectif de l’étude, le substrat témoin et de dilution (gamme de dilutions d’un sol contaminé)
peut être soit un sol non contaminé comparable à l’échantillon de sol à évaluer (sol de référence), soit un sol
standard (par exemple un sol artificiel).
Des informations sont fournies sur la manière d’utiliser cette méthode pour évaluer des produits chimiques
dans des conditions tempérées ainsi que dans des conditions tropicales.
La méthode ne s’applique pas aux substances volatiles, c’est-à-dire aux substances pour lesquelles H
(constante de Henry) ou le coefficient de partage air/eau est supérieur à 1, ou pour lesquelles la pression de
vapeur à 25 °C excède 0,013 3 Pa.
Cette méthode ne tient pas compte de l’éventuelle dégradation des substances ou contaminants pendant l’essai.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l’application du présent document. Pour les
références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s’applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 10381-6, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation
et la conservation, dans des conditions aérobies, de sols destinés à l’évaluation en laboratoire des processus,
de la biomasse et de la diversité microbiens
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
ISO 10694, Qualité du sol — Dosage du carbone organique et du carbone total après combustion sèche
(analyse élémentaire)
ISO 11260, Qualité du sol — Détermination de la capacité d’échange cationique effective et du taux de
saturation en bases échangeables à l’aide d’une solution de chlorure de baryum
ISO 11277, Qualité du sol — Détermination de la répartition granulométrique de la matière minérale des sols —
Méthode par tamisage et sédimentation
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
contaminant
substance ou agent présent(e) dans le sol et résultant de l’activité humaine
[ISO 15176:2002]
3.2
survie
pourcentage de vers vivants au terme de la période d’essai
3.3
mortalité
pourcentage de vers morts ou manquants au terme de la période d’essai
3.4
CL
concentration létale
pourcentage létal médian d’un échantillon soumis à essai dans un sol témoin standard ou un sol de référence,
ou concentration d’une substance dans l’échantillon soumis à essai, qui provoque la mort de 50 % des animaux
d’essai au cours de la période d’exposition
NOTE La CL est exprimée en pourcentage de masse sèche du sol d’essai par masse sèche du mélange d’essai.
3.5
essai limite
essai à une seule concentration comprenant au moins quatre réplicats pour chacun, l’échantillon pour essai
sans dilution ou la plus forte co
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11268-1
Deuxième édition
2012-11-01
Qualité du sol — Effets des polluants vis-
à-vis des vers de terre —
Partie 1:
Détermination de la toxicité aiguë vis-à-
vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei
Soil quality — Effects of pollutants on earthworms —
Part 1: Determination of acute toxicity to Eisenia fetida/Eisenia andrei
Numéro de référence
©
ISO 2012
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit
de l’ISO à l’adresse ci-après ou du comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
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Web www.iso.org
Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction . v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 3
5 Réactifs et matériaux . 4
6 Appareillage . 5
7 Mode opératoire . 6
7.1 Plan d’expérimentation . 6
7.2 Préparation des mélanges d’essai . 7
7.3 Introduction des vers de terre . 8
7.4 Conditions d’essai et mesurages . 8
7.5 Substance de référence . 9
8 Calcul et expression des résultats . 9
8.1 Calcul . 9
8.2 Expression des résultats . 9
9 Validité de l’essai . 9
10 Analyse statistique .10
10.1 Généralités .10
10.2 Essais à une seule concentration .10
10.3 Essais à plusieurs concentrations . 11
11 Rapport d’essai .12
Annexe A (informative) Détermination de la toxicité aiguë des substances chimiques (en particulier les
pesticides) sur les vers de terre dans des conditions d’essai tropicales .13
Annexe B (informative) Élevage d’Eisenia fetida et d’Eisenia andrei .15
Annexe C (informative) Détermination de la capacité de rétention d’eau .16
Annexe D (informative) Informations de base sur l’effet aigu de l’acide borique sur les vers de terre .17
Bibliographie .18
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée aux
comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du comité
technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales,
en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission
électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d’élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication
comme Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des comités membres votants.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de droits
de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir
identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L’ISO 11268-1 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 4,
Méthodes biologiques.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 11268-1:1993), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
L’ISO 11268 comprend les parties suivantes, présentées sous le titre général Qualité du sol — Effets des
polluants vis-à-vis des vers de terre:
— Partie 1: Détermination de la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Partie 2: Détermination des effets sur la reproduction de Eisenia fetida/Eisenia andrei
— Partie 3: Lignes directrices relatives à la détermination des effets sur site
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Introduction
Des systèmes d’essais écotoxicologiques sont mis en œuvre pour obtenir des informations sur les effets des
contaminants présents dans le sol et sont proposés en complément d’une analyse chimique conventionnelle
[33] [34]
(voir l’ISO 15799 et l’ISO 17616 ). L’ISO 15799 comprend une liste et une brève caractérisation des
systèmes d’essais recommandés et normalisés et l’ISO 17616 donne des lignes directrices pour le choix et
l’évaluation des essais biologiques. Les systèmes d’essais aquatiques sur éluat de sol sont mis en œuvre pour
obtenir des informations sur la fraction des contaminants susceptibles d’atteindre les eaux souterraines par le
mouvement de l’eau (fonction de rétention des sols), alors que les systèmes d’essais terrestres sont utilisés
pour évaluer la fonction d’habitat des sols. En tant que systèmes d’essais normalisés utilisant des vers de terre
comme organismes indicateurs pour la fonction d’habitat du sol, un essai de toxicité aiguë pour la survie et un
essai de toxicité chronique pour la reproduction sont disponibles.
La présente partie de l’ISO 11268 décrit une méthode basée sur la détermination de la toxicité aiguë des sols
contaminés pour des vers de terre adultes des espèces Eisenia fetida (Savigny 1826) et Eisenia andrei (André
1963). La méthode peut éventuellement être utilisée pour évaluer le potentiel toxique aigu pour les vers de terre
de produits chimiques ajoutés à un sol standard (par exemple un sol artificiel). En dernier lieu, des informations
sont fournies sur la manière d’utiliser cette méthode pour évaluer des produits chimiques dans des conditions
tropicales (voir l’Annexe A).
Eisenia fetida et Eisenia andrei sont considérés comme étant représentatifs de la faune du sol et des vers de
terre en particulier. Des informations de base sur l’écologie des vers de terre et leur utilisation en écotoxicologie
sont disponibles. D’autres espèces, par exemple Aporrectodea caliginosa, Lumbricus rubellus et Lumbricus
terrestris, ont également été utilisées comme organismes d’essai. En général, ces espèces ou d’autres ne
se sont pas avérées plus sensibles, et les bases de données et l’expérience dans l’évaluation des sols sont
[15][16][23]
réduites .
La présente partie de l’ISO 11268 a été élaborée en tenant compte des modes opératoires d’essai adoptés par
[26][27] [9]
l’Organisation de coopération et de développement économiques et par l’Union européenne .
NORME INTERNATIONALE ISO 11268-1:2012(F)
Qualité du sol — Effets des polluants vis-à-vis des vers de terre —
Partie 1:
Détermination de la toxicité aiguë vis-à-vis de Eisenia fetida/
Eisenia andrei
AVERTISSEMENT — Les sols contaminés peuvent contenir des mélanges inconnus de produits
chimiques toxiques, mutagènes ou nocifs d’une autre manière ou des micro-organismes infectieux.
Des risques pour la santé au travail peuvent survenir en raison de la poussière ou de l’évaporation de
produits chimiques pendant la manipulation et l’incubation. Il convient de prendre des mesures pour
éviter tout contact avec la peau.
1 Domaine d’application
La présente partie de l’ISO 11268 spécifie l’une des méthodes permettant d’évaluer la fonction d’habitat des sols
et de déterminer la toxicité aiguë de contaminants du sol et de produits chimiques pour Eisenia fetida/Eisenia
andrei par absorption cutanée et ingestion. Elle s’applique aux sols et aux matériaux de type sol de qualité
inconnue, provenant, par exemple, de sites contaminés, de sols amendés, de sols après remédiation, de sols
agricoles ou autres sites d’intérêt et de déchets.
Les effets des substances sont évalués à l’aide d’un sol standard, de préférence un substrat de sol artificiel
défini. Pour les sols contaminés, les effets sur la survie sont déterminés dans le sol soumis à essai et dans un
sol témoin. Selon l’objectif de l’étude, le substrat témoin et de dilution (gamme de dilutions d’un sol contaminé)
peut être soit un sol non contaminé comparable à l’échantillon de sol à évaluer (sol de référence), soit un sol
standard (par exemple un sol artificiel).
Des informations sont fournies sur la manière d’utiliser cette méthode pour évaluer des produits chimiques
dans des conditions tempérées ainsi que dans des conditions tropicales.
La méthode ne s’applique pas aux substances volatiles, c’est-à-dire aux substances pour lesquelles H
(constante de Henry) ou le coefficient de partage air/eau est supérieur à 1, ou pour lesquelles la pression de
vapeur à 25 °C excède 0,013 3 Pa.
Cette méthode ne tient pas compte de l’éventuelle dégradation des substances ou contaminants pendant l’essai.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l’application du présent document. Pour les
références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s’applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 10381-6, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation
et la conservation, dans des conditions aérobies, de sols destinés à l’évaluation en laboratoire des processus,
de la biomasse et de la diversité microbiens
ISO 10390, Qualité du sol — Détermination du pH
ISO 10694, Qualité du sol — Dosage du carbone organique et du carbone total après combustion sèche
(analyse élémentaire)
ISO 11260, Qualité du sol — Détermination de la capacité d’échange cationique effective et du taux de
saturation en bases échangeables à l’aide d’une solution de chlorure de baryum
ISO 11277, Qualité du sol — Détermination de la répartition granulométrique de la matière minérale des sols —
Méthode par tamisage et sédimentation
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
3.1
contaminant
substance ou agent présent(e) dans le sol et résultant de l’activité humaine
[ISO 15176:2002]
3.2
survie
pourcentage de vers vivants au terme de la période d’essai
3.3
mortalité
pourcentage de vers morts ou manquants au terme de la période d’essai
3.4
CL
concentration létale
pourcentage létal médian d’un échantillon soumis à essai dans un sol témoin standard ou un sol de référence,
ou concentration d’une substance dans l’échantillon soumis à essai, qui provoque la mort de 50 % des animaux
d’essai au cours de la période d’exposition
NOTE La CL est exprimée en pourcentage de masse sèche du sol d’essai par masse sèche du mélange d’essai.
3.5
essai limite
essai à une seule concentration comprenant au moins quatre réplicats pour chacun, l’échantillon pour essai
sans dilution ou la plus forte co
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