ISO 6888-1:2021
(Main)Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) — Part 1: Method using Baird-Parker agar medium
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) — Part 1: Method using Baird-Parker agar medium
This document specifies a horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci by counting the colonies obtained on a solid medium (Baird-Parker medium)[10] after aerobic incubation at 34 °C to 38 °C and coagulase confirmation. This document is applicable to: — products intended for human consumption; — products intended for animal feeding; — environmental samples in the area of food and feed production, handling, and — samples from the primary production stage. This horizontal method was originally developed for the examination of all samples belonging to the food chain. Because of the large variety of products in the food chain, it is possible that this horizontal method is not appropriate in every detail for all products. Nevertheless, it is expected that the required modifications are minimized so that they do not result in a significant deviation from this horizontal method. Based on the information available at the time of publication of this document, this method is not considered to be (fully) suited to the examination of fermented products or other products containing technological flora based on Staphylococcus spp (e.g. S. xylosus) (such as cheeses made from raw milk and certain raw meat products) likely to be contaminated by: — staphylococci forming atypical colonies on a Baird-Parker agar medium; — background flora that can obscure the colonies being sought. Nevertheless, both this document and ISO 6888-2 are given equivalent status.
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres espèces) — Partie 1: Méthode utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
Le présent document spécifie une méthode horizontale de dénombrement des staphylocoques à coagulase positive par comptage des colonies obtenues en milieu solide (milieu de Baird-Parker)[10] après incubation en aérobiose entre 34 °C et 38 °C et confirmation par coagulase. Le présent document s’applique aux: — produits destinés à la consommation humaine; — produits destinés à l’alimentation des animaux; — échantillons environnementaux prélevés dans les secteurs de la production et de la distribution des aliments; et — échantillons prélevés au stade de production primaire. Cette méthode horizontale a été élaborée à l’origine pour l’examen de tous les échantillons appartenant à la chaîne alimentaire. En raison de la grande diversité des produits de la chaîne alimentaire, il est possible que cette méthode horizontale ne soit pas appropriée dans ses moindres détails à tous les produits. Néanmoins, il est attendu que les modifications requises soient réduites le plus possible afin de ne pas s’écarter de manière significative de cette méthode horizontale. D’après les informations disponibles au moment de la publication du présent document, cette méthode n’est pas considérée comme étant (parfaitement) adaptée à l’examen des produits fermentés ou d’autres produits contenant une flore technologique fondée sur Staphylococcus spp (par exemple, S. xylosus) (tels que les fromages à base de lait cru et certains produits à base de viande crue) susceptibles d’être contaminés par: — des staphylocoques formant des colonies non caractéristiques sur un milieu gélosé de Baird-Parker; — une flore annexe pouvant masquer les colonies recherchées. Néanmoins, le présent document et l’ISO 6888-2 bénéficient d’un statut équivalent.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 6888-1
Second edition
2021-08
Microbiology of the food chain —
Horizontal method for the
enumeration of coagulase-positive
staphylococci (Staphylococcus aureus
and other species) —
Part 1:
Method using Baird-Parker agar
medium
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale
pour le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres espèces) —
Partie 1: Méthode utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
Reference number
©
ISO 2021
© ISO 2021
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Published in Switzerland
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Contents Page
Foreword .iv
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Principle . 2
4.1 General . 2
4.2 Incubation . 2
4.3 Enumeration and confirmation . 2
5 Culture media and reagents . 3
6 Equipment and consumables . 3
7 Sampling . 4
8 Preparation of the test sample . 4
9 Procedure. 4
9.1 Test portion, initial suspension and dilutions . 4
9.2 Inoculation and incubation . 4
9.3 Counting of colonies . 5
9.3.1 General description of colonies growing on BPA medium . 5
9.3.2 Colony counting procedure . 5
9.4 Confirmation . 6
9.4.1 General. 6
9.4.2 Tube test . . 6
9.4.3 Plate test using RPFA medium . 7
10 Expression of results . 7
11 Performance characteristics of the method . 8
11.1 Interlaboratory study . 8
11.2 Repeatability limit . 8
11.3 Reproducibility limit . 8
12 Test report . 9
13 Quality assurance . 9
Annex A (normative) Flow diagram of the procedure .10
Annex B (normative) Culture media and reagents .11
Annex C (informative) Results of the interlaboratory study .18
Bibliography .20
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www .iso .org/
iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology in collaboration with the European Committee for Standardization (CEN) Technical
Committee CEN/TC 463, Microbiology of the food chain, in accordance with the Agreement on technical
cooperation between ISO and CEN (Vienna Agreement).
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 6888-1:1999), which has been technically
revised. It also incorporates the amendments ISO 6888-1:1999/Amd 1:2003 and ISO 6888-1:1999/
Amd 2:2018. The main changes compared with the previous edition are as follows:
— the title has been changed to relate to the “Food chain”;
— the status of this document and ISO 6888-2 has been clarified;
— the document has been aligned with ISO 7218:2007, i.e. pour molten agar medium at 44 °C to 47 °C;
— all occurrences, when appropriate, have been changed from “35 °C or 37 °C” to “34 °C to 38 °C”;
— all occurrences of incubation time, when appropriate, have been changed from “18 h to 24 h” to
“24 h ± 2 h”;
— requirements have been added to use ISO 11133;
— all available standards related to sampling techniques have been updated;
— a description of typical and atypical colonies on Baird-Parker agar (BPA) medium has been updated;
— the rabbit plasma fibrinogen agar (RPFA) medium has been added as an alternative to the coagulase
test for confirmation;
— the flow diagram procedure in Annex A has been updated;
— culture media and reagents with performance testing in Annex B have been added;
iv © ISO 2021 – All rights reserved
— results of the interlaboratory study (from ISO 6888-1:1999/Amd 1:2003, Precision data) has been
updated;
— the Bibliography has been updated.
A list of all parts in the ISO 6888 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
Introduction
This document, ISO 6888-2 and ISO 6888-3 describe three horizontal methods for the detection
and enumeration of coagulase-positive staphylococci among which enterotoxinogenic strains are
encountered. It is mainly concerned with Staphylococcus aureus, but also with S. intermedius and certain
strains of S. hyicus.
For the purposes of this document, the confirmation of typical and atypical colonies is based on a
positive coagulase reaction, but it is recognized that some strains of Staphylococcus aureus give weakly
positive coagulase reactions. These latter strains can be confused with other bacteria but they can be
distinguished by the use of additional tests not included in this document, such as tests for sensitivity
to lysostaphin, and production of haemolysin, thermostable nuclease and acid from mannitol (see
ISO 7218 and Reference [15]).
The main technical changes listed in the Foreword, introduced in this document compared with the
previous edition are considered as minor (see ISO 17468). They have a minor impact on the performance
characteristics of this method.
Results of the interlaboratory study and samples tested are described in Annex C.
vi © ISO 2021 – All rights reserved
INTERNATIONAL STANDARD ISO 6888-1:2021(E)
Microbiology of the food chain — Horizontal method
for the enumeration of coagulase-positive staphylococci
(Staphylococcus aureus and other species) —
Part 1:
Method using Baird-Parker agar medium
WARNING — In order to safeguard the health of laboratory personnel, it is essential that tests
for detecting staphylococci are only undertaken in properly equipped laboratories, under the
control of a skilled microbiologist, and that great care is taken in the disposal of all incubated
materials. Persons using this document should be familiar with normal laboratory practice.
This document does not purport to address all of the safety aspects, if any, associated with its
use. It is the responsibility of the user to establish appropriate safety and health practices.
1 Scope
This document specifies a horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci
[10]
by counting the colonies obtained on a solid medium (Baird-Parker medium) after aerobic incubation
at 34 °C to 38 °C and coagulase confirmation.
This document is applicable to:
— products intended for human consumption;
— products intended for animal feeding;
— environmental samples in the area of food and feed production, handling, and
— samples from the primary production stage.
This horizontal m
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 6888-1
Deuxième édition
2021-08
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Méthode horizontale
pour le dénombrement des
staphylocoques à coagulase positive
(Staphylococcus aureus et autres
espèces) —
Partie 1:
Méthode utilisant le milieu gélosé de
Baird-Parker
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the
enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus
aureus and other species) —
Part 1: Method using Baird-Parker agar medium
Numéro de référence
©
ISO 2021
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
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Web: www.iso.org
Publié en Suisse
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Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 2
3 Termes et définitions . 2
4 Principe . 2
4.1 Généralités . 2
4.2 Incubation . 2
4.3 Dénombrement et confirmation . 3
5 Milieux de culture et réactifs . 3
6 Équipement et consommables . 3
7 Échantillonnage . 4
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 4
9 Mode opératoire. 4
9.1 Prise d’essai, suspension mère et dilutions . 4
9.2 Ensemencement et incubation . 4
9.3 Comptage des colonies . 5
9.3.1 Description générale des colonies cultivant sur un milieu BPA . 5
9.3.2 Mode opératoire de comptage des colonies . 5
9.4 Confirmation . 6
9.4.1 Généralités . 6
9.4.2 Essai en tube . 6
9.4.3 Essai sur boîte de milieu RPFA . 7
10 Expression des résultats. 8
11 Caractéristiques de performance de la méthode . 8
11.1 Étude interlaboratoires . 8
11.2 Limite de répétabilité . 8
11.3 Limite de reproductibilité . 8
12 Rapport d’essai . 9
13 Assurance qualité .10
Annexe A (normative) Logigramme du mode opératoire .11
Annexe B (normative) Milieux de culture et réactifs .12
Annexe C (informative) Résultats de l’étude interlaboratoires .19
Bibliographie .22
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ fr/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 9, Microbiologie, en collaboration avec le comité technique CEN/TC 463, Microbiologie de la
chaîne alimentaire, du Comité européen de normalisation (CEN), conformément à l’Accord de coopération
technique entre l’ISO et le CEN (Accord de Vienne).
Cette seconde édition annule et remplace la première édition (ISO 6888-1:1999), qui a fait l’objet
d’une révision technique. Elle intègre également les amendements ISO 6888-1:1999/Amd 1:2003
et ISO 6888-1:1999/Amd 2:2018. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont
les suivantes:
— le titre a été modifié pour faire référence à la «chaîne alimentaire»;
— le statut du présent document et de l’ISO 6888-2 a été clarifié;
— le document a été aligné sur l’ISO 7218:2007, par exemple il indique de verser le milieu gélosé fondu
à une température comprise entre 44 °C et 47 °C;
— toutes les occurrences de «35 °C ou 37 °C», le cas échéant, ont été remplacées par «entre 34 °C
et 38 °C»;
— toutes les occurrences des durées d’incubation «18 h à 24 h», le cas échéant, ont été remplacées
par4«24 h ± 2 h»;
— des exigences ont été ajoutées pour utiliser l’ISO 11133;
— toutes les normes disponibles concernant les techniques de prélèvement ont été mises à jour;
— la description des colonies caractéristiques et non caractéristiques sur un milieu gélosé de Baird-
Parker (BPA) a été mise à jour;
iv © ISO 2021 – Tous droits réservés
— le milieu gélosé au plasma de lapin et au fibrinogène (RPFA) a été ajouté afin d’offrir une alternative
à l’essai de coagulase pour confirmation;
— le mode opératoire sous forme de logigramme à l’Annexe A a été mis à jour;
— les milieux de culture et réactifs avec essais de performance ont été ajoutés à l’Annexe B;
— les résultats de l’étude interlaboratoires (provenant des données de fidélité de l’ISO 6888-1:1999/
Amd1: 2003) ont été mis à jour;
— la Bibliographie a été mise à jour.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 6888 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
Introduction
Le présent document, l’ISO 6888-2 et l’ISO 6888-3 décrivent trois méthodes horizontales pour la
détection et le dénombrement de staphylocoques à coagulase positive parmi lesquels se rencontrent
les souches entérotoxinogènes. Il s’agit principalement de Staphylococcus aureus, mais également
de S. intermedius et de certaines souches de S. hyicus.
Pour les besoins du présent document, la confirmation des colonies caractéristiques et non
caractéristiques repose sur une réaction positive à la coagulase, mais il est reconnu que certaines
souches de Staphylococcus aureus donnent une réaction faiblement positive à la coagulase. Ces
dernières souches peuvent être confondues avec d’autres bactéries, mais elles peuvent être distinguées
en procédant à des essais complémentaires non inclus dans le présent document, tels que des essais
pour la sensibilité à la lysostaphine, et la production d’hémolysine, de nucléase thermostable et d’acide
à partir de mannitol (voir l’ISO 7218 et la Référence [15]).
Les principales modifications techniques énumérées dans l’avant-propos qui ont été apportées au présent
document par rapport à la précédente édition sont considérées comme mineures (voir l’ISO 17468).
Elles ont un impact mineur sur les caractéristiques de performance de cette méthode.
Les résultats de l’étude interlaboratoires et les échantillons soumis à essai sont décrits à l’Annexe C.
vi © ISO 2021 – Tous droits réservés
NORME INTERNATIONALE ISO 6888-1:2021(F)
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode
horizontale pour le dénombrement des staphylocoques
à coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres
espèces) —
Partie 1:
Méthode utilisant le milieu gélosé de Baird-Parker
AVERTISSEMENT — Afin de préserver la santé du personnel de laboratoire, il est essentiel
que les essais de recherche de staphylocoques ne soient effectués que dans des laboratoires
correctement équipés, s
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.