ISO 19344:2015
(Main)Milk and milk products — Starter cultures, probiotics and fermented products — Quantification of lactic acid bacteria by flow cytometry
Milk and milk products — Starter cultures, probiotics and fermented products — Quantification of lactic acid bacteria by flow cytometry
ISO 19344:2015 specifies a standardized method for the quantification of active and/or total lactic acid bacteria and probiotic strains in starter cultures used in dairy products by means of flow cytometry. The method is also applicable to probiotics used in dairy products and to fermented milk products such as yogurts containing primarily lactic acid bacteria. This International Standard does not apply to taxonomical differentiation of bacteria. Due to its non-specificity, the method may quantify other bacteria than those within the scope of this International Standard, when present in the sample. This may lead to overestimation of the counts. The minimum bacterial cell concentration in the sample before applying this standardized method depends on the dilution rates used in the individual protocols. Typically 106 cells per gram or ml are considered within the minimum range.
Lait et produits laitiers — Ferments lactiques, probiotiques et produits fermentés — Quantification de bactéries lactiques par cytométrie en flux
L'ISO 19344:2015 spécifie une méthode normalisée permettant de quantifier les bactéries lactiques actives et/ou totales et les souches probiotiques dans les ferments lactiques utilisés dans les produits laitiers, au moyen de la cytométrie en flux. La méthode s'applique également aux probiotiques utilisés dans les produits laitiers et aux produits laitiers fermentés, tels que les yaourts, contenant essentiellement des bactéries lactiques. L'ISO 19344:2015 ne s'applique pas à la différenciation taxonomique des bactéries. En raison de sa non-spécificité, la méthode peut quantifier d'autres bactéries que celles indiquées dans le domaine d'application de l'ISO 19344:2015, lorsqu'elles sont présentes dans l'échantillon. Cela peut conduire à une surestimation des dénombrements. La concentration minimale de cellules bactériennes dans l'échantillon avant l'application de cette méthode normalisée dépend des taux de dilution utilisés dans chaque protocole. En général, on considère que 106 cellules par gramme ou ml se situent dans la plage minimale.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 19344
IDF
First edition
2015-12-15
Milk and milk products — Starter
cultures, probiotics and fermented
products — Quantification of lactic
acid bacteria by flow cytometry
Lait et produits laitiers — Cultures, probiotiques et produits fermentés
— Quantification de bactéries lactiques par cytométrie en flux
Reference numbers
IDF 232:2015(E)
©
ISO and IDF 2015
IDF 232:2015(E)
© ISO and IDF 2015, Published in Switzerland
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IDF 232:2015(E)
Contents Page
Forewords .iv
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Diluents and reagents . 3
5.1 General . 3
5.2 Peptone-salt solution . 3
5.3 Diluents and reagents for staining protocols . 3
5.3.1 Protocol A . 4
5.3.2 Protocol B . 4
5.3.3 Protocol C . 5
6 Apparatus . 6
7 Sampling . 7
8 Preparation of test sample . 7
8.1 General . 7
8.2 Freeze-dried cultures . 7
8.3 Frozen cultures . 8
8.4 Fermented milk products . 8
9 Procedure. 8
9.1 General . 8
9.2 Staining . 8
9.2.1 Protocol A . 9
9.2.2 Protocol B . 9
9.2.3 Protocol C . 9
9.3 Flow cytometry analysis .10
9.3.1 General.10
9.3.2 Instruments and settings .10
9.4 Gating .11
9.4.1 General.11
9.4.2 Protocol A .11
9.4.3 Protocol B .13
9.4.4 Protocol C .14
10 Calculation and expression of results .15
11 Critical factors affecting results .16
12 Precision .17
12.1 Interlaboratory test.17
12.2 Repeatability .18
12.3 Reproducibility .18
13 Test report .18
Annex A (informative) Diagram of staining protocols .19
Annex B (informative) Calculation example of the appropriate sample dilution .21
Annex C (informative) Interlaboratory test.22
Bibliography .25
IDF 232:2015(E)
Forewords
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity
assessment, as well as information about ISO’s adherence to the WTO principles in the Technical
Barriers to Trade (TBT) see the following URL: Foreword - Supplementary information
The committee responsible for this document is ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk
and milk products and the International Dairy Federation (IDF). This document is being published
jointly by ISO and IDF.
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IDF 232:2015(E)
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit private sector organization representing the
interests of various stakeholders in dairying at the global level. IDF members are organized in National
Committees, which are national associations composed of representatives of dairy-related national
interest groups including dairy farmers, dairy processing industry, dairy suppliers, academics and
governments/food control authorities.
ISO and IDF collaborate closely on all matters of standardization relating to methods of analysis
and sampling for milk and milk products. Since 2001, ISO and IDF jointly publish their International
Standards using the logos and reference numbers of both organizations.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
ISO 19344 | IDF 232 was prepared by the IDF Standing Committee on Analytical Methods for Dairy
Microorganisms and the ISO Technical Committee ISO/TC 34 on Food products, Subcommittee SC 5 on
Milk and milk products.
The work was carried out by the IDF/ISO Project Group on Quantification of Lactic Acid Bacteria by Flow
Cytometry of the Standing Committee on Analytical Methods for Dairy Microorganisms under the aegis of
its project leader, Sandra Casani (DK), Ph.D.
IDF 232:2015(E)
Introduction
Quantification of lactic acid bacteria is an important factor in assessing the quality of starter cultures,
probiotics and fermented milk products. Examination of lactic acid bacteria in these products can be
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 19344
FIL
Première édition
2015-12-15
Lait et produits laitiers — Ferments
lactiques, probiotiques et produits
fermentés — Quantification de
bactéries lactiques par cytométrie en
flux
Milk and milk products — Starter cultures, probiotics and fermented
products — Quantification of lactic acid bacteria by flow cytometry
Numéros de référence
FIL 232:2015(F)
©
ISO et FIL 2015
FIL 232:2015(F)
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FIL 232:2015(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Diluants et réactifs . 3
5.1 Généralités . 3
5.2 Solution de peptone-sel . 3
5.3 Diluants et réactifs pour les protocoles de coloration . 3
5.3.1 Protocole A . 4
5.3.2 Protocole B . 5
5.3.3 Protocole C . 5
6 Appareillage . 6
7 Échantillonnage . 7
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 7
8.1 Généralités . 7
8.2 Cultures lyophilisées . 7
8.3 Cultures congelées . 8
8.4 Produits laitiers fermentés . 8
9 Mode opératoire. 9
9.1 Généralités . 9
9.2 Coloration . 9
9.2.1 Protocole A . 9
9.2.2 Protocole B . 9
9.2.3 Protocole C .10
9.3 Analyse par cytométrie en flux .10
9.3.1 Généralités .10
9.3.2 Instruments et réglages .11
9.4 Fenêtrage .12
9.4.1 Généralités .12
9.4.2 Protocole A .12
9.4.3 Protocole B .14
9.4.4 Protocole C .15
10 Calcul et expression des résultats .16
11 Facteurs critiques affectant les résultats .18
12 Fidélité .19
12.1 Essai interlaboratoires .19
12.2 Répétabilité .19
12.3 Reproductibilité .19
13 Rapport d’essai .20
Annexe A (informative) Schéma des protocoles de coloration .21
Annexe B (informative) Exemple de calcul de la dilution appropriée de l’échantillon .23
Annexe C (informative) Essai interlaboratoires .24
Bibliographie .27
© ISO et FIL 2015 – Tous droits réservés iii
FIL 232:2015(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www.
iso.org/directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou sur la liste ISO des déclarations de
brevets reçues (voir www.iso.org/patents).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la signification des termes et expressions spécifiques de l’ISO liés à
l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de l’ISO aux principes
de l’OMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos -
Informations supplémentaires.
Le comité chargé de l’élaboration du présent document est l’ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération Internationale du Lait (FIL). Le présent document
est publié conjointement par l’ISO et la FIL.
iv © ISO et FIL 2015 – Tous droits réservés
FIL 232:2015(F)
La FIL (Fédération internationale du lait) est une organisation privée à but non lucratif qui représente
les intérêts des divers acteurs de la filière laitière au niveau international. Les membres de la FIL sont
organisés en comités nationaux, qui sont des associations nationales composées de représentants de
groupes d’intérêt nationaux dans le secteur des produits laitiers, incluant des producteurs laitiers, des
acteurs de l’industrie de transformation des produits laitiers, des fournisseurs de produits laitiers, des
universitaires et des représentants des gouvernements/autorités chargées du contrôle des aliments.
L’ISO et la FIL collaborent étroitement sur toutes les activités de normalisation concernant les méthodes
d’analyse et d’échantillonnage du lait et des produits laitiers. Depuis 2001, l’ISO et la FIL publient
conjointement leurs Normes internationales en utilisant les logos et les numéros de référence des deux
organisations.
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
L’ISO 19344 | FIL 232 a été élaborée par le Comité
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.